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利什受原虫患者活组织中检测利什受病毒

    利什曼病毒(LRV)为双链RNA病毒,基因组长约5 kb,属于Totiviridae科。从两个新大陆株(LRV1-1和4)和l个旧大陆株(LRV 2-1)中提取的全长核昔酸序列已见报道。LRV能持续感染某些体外培养的利什曼原虫株。本实验通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来检测在实验室培养之前,LR V是否已存在于人体活组织中的利什曼原虫中。

    1996年秋在秘鲁的库斯科收集了皮肤利什曼病患者的活组织材料,经冷冻处理后运至实验室。提取样本中的核酸,以此为模板,加入识别LRVl-1和LRV1-4 mRNA 5’端保守序列的引物进行RT-PCR,获得11个产物,同时以LRV i-4为模板进行同样的RT-PCR反应作为阳性对照,电泳结果显示第6泳道和第8泳道扩增到预期的RT-PCR条带,分别记为样本1和2。这两个样本与来源于LRV1-4 mRNA 5‘端的探针进行杂交,均显示阳性条带,但1号样本信号较弱,原因不明。对1,2号样本进行克隆和测序,两者之间仅有一个碱基对的差异,与LRV1-4的基因序列均有90%的同源性。此研究表明,LRV存在于利什曼病患者的活组织中。

    LRV的存在是否会改变利什曼原虫的表型和影响利什曼原虫的致病机制已引起了人们的极大兴趣,若如此,则LRV可作为标志物对人体利什曼病提供有价值的预后指示。但是,利什曼病毒的存在是与自愈型的利什曼原虫有关,还是与更具危险性的皮肤粘膜型利什曼原虫感染有关,尚有待于更进一步的实验证明。

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